В качестве одного из маркеров нарушения консолидации переломов костей конечностей может использоваться сочетание генотипов -25Pro/Pro гена TGF -2073Т/T гена EGFR, что позволит использовать персонифицированную профилактическую программу для предотвращения данной группы осложнений.

В современных условиях нарушения консолидации при переломах остаются нерешенной проблемой [1, 2, 3]. В течении и исходе нарушений консолидации при травматической болезни важную роль играют многие факторы [1, 4], в том числе и наследственные [5, 6, 7].

В исследование включено 108 пациентов в возрасте от 20 до 40 лет (по классификации ВОЗ) с переломами костей конечностей, находившихся на стационарном лечении в ГУЗ «Городская клиническая больница No 1» г. Чита. Исследуемые рандомизированы в две группы: первую группу (n = 62) составили пациенты с неосложнённым течением переломов длинных костей. Больные с замедленной консолидацией объединены во вторую группу (n = 46).

В работе с обследуемыми лицами соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинкской Декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (World Medical Association Declaration of Helsinki (1964, 2011 – поправки)) и "Правилами клинической практики в Российской Федерации", утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. No 266. Формирование групп пациентов осуществляли в соответствии с классификацией переломов, предложенной М.Е. Mюллером и соавт. (1996) (рис. 1)

Градация пациентов в зависимости от вида оперативного пособия представлена в таблице 1. Оперативное лечение выполнялось в первые 2-4 часа с момента поступления в стационар, последующее консервативное лечение осуществлялось согласно действующим руководствам [9].

Диагноз нарушения консолидации верифицировали с помощью клинических, лабораторных и инструментальных методов исследования [9]. Некоторые клинические, лабораторные и инструментальные методы (210 показателей) оценивались в многомерной прогностической регрессионной модели. Параметры исследовались при поступлении в стационар, затем на 2, 5, 10 и 90 сутки травматической болезни. Рассматриваемые анамнестические и клинические данные соответствовали рекомендуемым в диагностике переломов и осложнений [9].

Лабораторные данные: – показатель лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии (ЛТА); – некоторые цитокины (IL1α, IL1β, ФНОα, IL-4, IL - 10, TGFα, TGF1β, EGF); – параметры адениловой (АТФ, АДФ, АМФ) и антипротеазной систем (α2-макроглобулин, α1 - антитрипсин); – значения системы «ПОЛ-антиоксиданты» (кето - диены и сопряженные триены, ТБК-активные продукты, малоновый диальдегид, конъюгированные диеновые структуры, общая антиоксидантная активность).

Исследование вышеуказанных параметров производилось стандартными методами [1]. Носительство полиморфных маркеров генов (TNFα (G-308А), гена IL-4 (С 589Т), гена IL-10 (G-1082A, C-592A, C-819T), TGFβ 1 (Arg-25Pro) и EGFR (A-2073T)) выявляли, используя наборы «Литех»-«SNP» (Москва) [10]. Инструментальные методы: – лазерная допплеровская флоуметрия (показатели микроциркуляторного русла); – рентгенологическое исследование [1].

Статистическая обработка выполнялась с помощью пакета программ STATISTICA 6.1 (StatSoft, Russia). В качестве многомерного метода статистического анализа использован регрессионный анализ [11]

Используемый многомерный (пошаговый с включением) регрессионный анализ выявил высокую связь генотипа -25Pro/Pro гена TGFβ 1 с нарушением консолидации в позднем периоде травмы. Точность данной математической модели значимо увеличивалась при добавлении генотипа -2073Т/T гена EGF, тогда как другие показатели статистически значимого влияния на прогноз не оказали (табл. 2). Коэффициент (К) корреляции (множественный) регистрировался на уровне 0,985, К детерминации (R 2 ) составил 0,967, а уровень значимости регрессионной модели составил < 0,0000001. Генотип -25Pro/Pro гена TGFβ 1 оказался наиболее важным прогностическим фактором в нарушении консолидации при переломах (риск увеличен в 53 раза). Генотип -2073Т/T гена EGFR также вносит существенный вклад в диагностику нарушений репарации костной ткани (риск повышается в 39 раз) (табл. 2).

Полученная прогностическая модель имеет достаточно высокую чувствительность и достоверность (p < 0,0000001). О данном факте свидетельствует не только высокая степень соответствия эмпирическим данным (R 2), линейная подчиненность факторов влияния и отклика, т.е. развития осложнения (К), но и учтенные параметры влияния на осложнения, которых выявлено всего два – это -25Pro/Pro гена TGFβ 1 и -2073T/Т гена EGFR (скорректированный R 2 не отличается от исходного) (11).

К настоящему времени в гене TGFβ 1 выявлено более десяти полиморфных сайтов. Их роль до конца не вы - явлена, однако имеются данные о влиянии тех или иных генотипов полиморфных участков на состояние костной массы [6, 14, 15, 16] и при некоторых заболеваниях же - лудочно-кишечного тракта [17]. Рассматривая влияние наследственного фактора на течение репаративных про - цессов костной ткани при переломах, отмечено, что но - сительство генотипа -25Pro/Pro гена TGFβ 1 -25Arg > Pro приводит к уменьшению экспрессии кодируемого белка (TGFβ1), что, в свою очередь, способствует дезорганизации процессов ремоделирования костной ткани и, тем самым, замедляет консолидацию переломов [12].

 

Что касается гена EGFR, то его влияние в настоящее время активно исследуется при злокачественных новообразованиях [13], хотя и имеются единичные исследования при переломах длинных костей [5].

Возможно, что различные комбинации носительства генотипов разных полиморфных участков генов могут способствовать разнонаправленному синтезу кодируемых белков и, соответственно, приводить либо к заболеваниям (осложнениям), либо осуществлять протективный эффект. Данный факт подтверждают изыскания многих исследователей [13, 14].

1.Мироманов А.М., Намоконов Е.В. Прогностические критерии развития осложнений при переломах костей конечностей. Чита: РИЦ ЧГМА, 2014. 175 с.

2.Павлов Д.В., Новиков А.Е. Интрамедуллярный остеосинтез при лечении несросшихся переломов и ложных суставов большеберцовой кости // Травматология и ортопедия России. 2009. No 2. С. 106-111.

3.Сочетанное применение обогащенной тромбоцитами аутоплазмы и биокомпозиционного материала Коллапан в комплексном лечении больных с длительно несрастающимися переломами и ложными суставами длинных костей конечностей / Г. А. Кесян, Г. Н. Берченко, Р.

З.Уразгильдеев, Д. С. Микелаишвили, Б. Н. Шулашов // Вестн. травматологии и ортопедии им Н. Н. Приорова. 2011. No 2. С. 26-32.

4.Берченко Г.Н. Биология заживления переломов кости и влияние биокомпозиционного наноструктурированного материала коллапан на активизацию репаративного остеогенеза // Мед. алфавит. 2011. Т. 1, No 2. С. 14-19.

5.Мироманов А.М., Гусев К.А., Усков С.А. Полиморфизм гена TGFβ1 (Arg25Pro) и гена EGFR (А2073Т) у больных с нарушением консолидации переломов в Забайкальском крае // Фундам. исслед. 2014. No 10-7. С. 1360-1364.

6.Полиморфизм гена трансформирующего фактора роста бета 1 при постменопаузальном остеопорозе / М. Ю. Крылов, К. А. Маслова, Т.А.Короткова, Н. А. Торопцова, О. А. Никитинская, Н. В. Демин, В. А. Мякоткин, Л. И. Беневоленская // Науч.-практ. ревматология. 2009. No 1. С. 18-23.

7.Cytokine gene polymorphism in human disease: on-line databases, supplement 1 / J. Bidwell, L. Keen, G. Gallagher, R. Kimberly, T. Huizinga, M.F.McDermott, J. Oksenberg, J. McNicholl, F. Pociot, C. Hardt, S. D’Alfonso // Genes. Immun. 2001. Vol. 2, no. 2, pp. 61-70.

8.Об утверждении стратегии развития медицинской науки в Российской Федерации на период до 2025 года : распоряжение Правительства РФ No 2580-р : от 28.12.2012 [Электронный ресурс] // КонсультантПлюс, 2012.

9.Ортопедия. Национальное руководство / под ред. С. П. Миронова, Г. П. Котельникова. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. 840 с.

10.Полиморфизм гена TNF-α (G-308А) у больных с гнойно-воспалительными осложнениями при переломах длинных костей конечностей в

12.Мироманов А.М., Гусев К.А., Мироманова Н.А. Влияние полиморфизма гена TGFβ1-25Arg>Pro на экспрессию ростового фактора TGFβ1 у больных с нарушением консолидации переломов в Забайкальском крае // Фундам. исслед. 2015. No 1-5. С. 1008-1012.

13.Молекулярно-генетические исследования в практике онкологической клиники / Н.Е. Торопова, Е.В. Закамова, Ю.Ю. Тетерина, С.В. Козлов, Н.В. Тимофеева, Г.П. Морошкина, С.Г. Нетелева, Е.Н. Липатова, Л.В. Трухова, Е.В. Фролова // Изв. Самар. науч. центра РАН. 2015. No 2. С. 690-696.

14.Оценка значимости полиморфизмов генов LRP5, BMP4, TGFβ1 при постменопаузальном остеопорозе // В. А. Мякоткин, М. Ю. Крылов, Л. Ю. Казеева, К. А. Маслова, Н. В. Торопцова, О. А. Никитинская, Л. М. Беневоленская // Науч.-практ. ревматология. 2008. No 3. С. 8-15.

15.Association of a polymorphism of the transforming growth factor beta-1 gene with plevalent vertebral fractures in Japanese women / Y. Yamada, A. Miyauchi, Y. Takagi, K. Nakauchi, N. Miki, M. Mizuno, A. Harada // Am. J. Med. 2000. Vol. 109, no. 3, pp. 244-247.

16.Evidence of association and linkage disequilibrium between a novel polymorphism in the transforming growth factor beta 1 gene and hip bone mineral density: a study of female twins / R.W. Keen, H. Snieder, H. Molloy, J. Daniels, M. Chiano, F. Gibson, L. Fairbairn, P. Smith, A.J.MacGregor, D. Gewert, T.D. Spector // Rheumatology. 2001. Vol. 40, no. 1, pp. 48-54.

17.Analysis of common transforming growth factor beta-1 gene polymorphisms in gastric and duodenal ulcer disease: pilot study / A.V. Polonikov, V.P.Ivanov, D.A. Belugin, I.V. Khoroshaya, I.O. Kolchanova, M.A. Solodilova, M.P. Tutochkina, A.A. Stepchenko // J. Gastroenterol. Hepatol. 2007. Vol. 22, no. 4, pp. 555-564